產品介紹
細胞名稱:人腎上腺皮質腺癌細胞
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:該細胞系源于多能腎上腺皮質癌細胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,從腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經改變培養(yǎng)條件:獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。
培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/
傳代方法: 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況: C3
凍存條件:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 人腎上腺皮質腺癌細胞 |
英文簡稱 | NCI-H295R |
狀態(tài) | 貼壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.人腎上腺皮質腺癌細胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。